武漢電泳設備中電泳出現拖尾現象，英文成為smear，就是彌散。其原因，主要從以下兩個方面考慮：

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1、PCR產物自身原因：

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往往由于酶量過多或酶的質量差，dNTP濃度過高，Mg2+濃度過高，

退火溫度過低，循環(huán)次數過多，而造成PCR的非特異性產物過多。

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對策：

①減少Taq酶的量，或調換另一來源的酶。

②減少dNTP的濃度。

③適當降低Mg2+濃度。

④增加模板量，減少引物的用量，減少循環(huán)次數，提高退火溫度。

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2、電泳體系的問題：

（1）電泳緩沖液TAE或者TBE的污染，建議更換緩沖液。

（2）上樣時樣品漂了，建議增加上樣緩沖液的用量，以及小心加樣。

（3）電壓太高。

（4）適當把你的膠的濃度加大。（根據你的片斷大小而定）

（5）觀察你的marker是否也存在拖尾現象，作為對照。

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PCR拖尾及假陽性的原因及對策

拖尾現象：產物在凝膠上呈Smear狀態(tài)。

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原因：

1.模板不純

2.Buffer不合適

3.退火溫度偏低

4.酶量過多

5.dNTP、Mg2+濃度偏高

6.循環(huán)次數過多

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對策：

1.純化模板

2.更換Buffer

3.適當提高退火溫度

4.適量用酶

5.適當降低dNTP和鎂離子的濃度

6.減少循環(huán)次數

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假陽性

現象：空白對照出現目的擴增產物

原因：

靶序列或擴增產物的交叉污染

對策：

1.操作時應小心輕柔，防止將靶序列吸入加樣槍內或濺出離心管外；

2.除酶及不能耐高溫的物質外，所有試劑或器材均應高壓消毒。所用離心管及加樣槍頭等均應一次性使用。

3.各種試劑最好先進行分裝，然后低溫貯存

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武漢電泳設備運行中出現的問題要及時應對，有因有果，找對方法一定可以很好解決電泳設備中電泳出現拖尾現象！